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簡述msc無血清培養(yǎng)基的使用注意事項
點擊次數(shù):1120 更新時間:2023-01-16
  大多數(shù)細胞在msc無血清培養(yǎng)基中單獨培養(yǎng)時都不能增殖,它們需要補充額外的生長因子和細胞因子,如激素、轉(zhuǎn)運蛋白、微量元素或ECM因子。激素如胰島素、生長激素等胰島素作為一種多肽激素,對哺乳動物細胞具有多效合成作用,促進葡萄糖和氨基酸攝取、脂肪生成、單價陽離子和磷酸轉(zhuǎn)運、蛋白質(zhì)和核酸合成。轉(zhuǎn)運蛋白,如轉(zhuǎn)鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白作為鐵的載體,也有助于降低氧自由基和過氧化氫的毒性水平。ECM因子是某些貼壁生長細胞所必需的組分,如纖連蛋白、膠原蛋白、層粘連蛋白等。
 
  下面為大家分享一下msc無血清培養(yǎng)基的使用注意事項:
 
  1、細胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水,生產(chǎn)上一般為注射用水。
 
  2、建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,組分可能會變質(zhì)或因受潮而結(jié)團。
 
  3、溶解干粉培養(yǎng)基時先加入終體積90%-95%的培養(yǎng)用水,添加劑加完后再補足。
 
  4、如需添加的組分較多時,某一組分*溶解后,再添加另一組分。
 
  5、待msc無血清培養(yǎng)基溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產(chǎn)生沉淀。
 
  6、所有成分溶解后,培養(yǎng)基應立即過濾或高壓除菌,以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。
 
  7、在過濾除菌時,一般情況下應調(diào)pH比所需值低0.1~0.2個單位,因過濾除菌后,pH值會升高約0.2。
 
  8、在細胞培養(yǎng)過程中,建議不加或加少量的抗生素,如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應降低一些。
 
  9、建議用1NHCl或1NNaOH來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,因為用碳酸氫鈉來調(diào)對培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大。
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