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NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U
NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U
訪問(wèn)次數(shù):3086
所屬分類(lèi):NEB
報(bào)    價(jià):

NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U
■ 高效連接粘性末端和平末端
■ T/A 克隆
■ dsDNA 切刻修復(fù)

產(chǎn)品概述:
產(chǎn)地類(lèi)別進(jìn)口

NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U

特性

 

■  高效連接粘性末端和平末端
■  T/A 克隆
■  dsDNA 切刻修復(fù)
■  構(gòu)建高豐度克隆文庫(kù)
■  RNA 和 DNA 的連接

NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U

概述

 

該酶催化雙鏈 DNA 或 RNA 上相鄰的 5′-磷酸末端和 3′-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化平齊末端或粘性末端之間的連接,還可以修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切刻。

來(lái)源

 

純化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。

反應(yīng)條件

 

1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,10 mM DTT,1 mM ATP]。推薦 DNA 5′ 末端濃度為 0.1-1.0 μM,16℃ 溫育。
熱失活:65℃ 10 分鐘。

單位定義(粘性末端活性單位)

 

1 單位指在 20 μl 1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液中,16℃ 反應(yīng)條件下,30 分鐘能使 50% 的經(jīng) HindⅢ 消化的λDNA 片段 [ 5′ 端濃度為 0.12 μM(300 μg/ml)] 連接所需的酶量。

濃度

 

400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。

注意事項(xiàng)

 

與 E. coli DNA 連接酶需要 NAD+ 作輔因子不同,T4 DNA 連接酶的輔因子是 ATP。


稀釋后的 T4 DNA 連接酶應(yīng)于 -20℃、50% 甘油貯存緩沖液(稀釋緩沖液 A,NEB #B8001)中保存。如稀釋后馬上使用,也可用 1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液稀釋。


只要在反應(yīng)體系中補(bǔ)加 1 mM ATP,連接反應(yīng)就可以在 NEB 提供的四種限制性內(nèi)切酶緩沖液或在

T4 DNA 多聚核苷酸激酶反應(yīng)緩沖液中進(jìn)行。

 

T4 DNA 連接酶                      

貨 號(hào)

規(guī) 格

價(jià) 格

北京庫(kù)存

上海庫(kù)存

#M0202L

100,000 units

 

#M0202M

(高濃度5X) 100,000 units

 

#M0202S

20,000 units

 

#M0202T

(高濃度5X) 20,000 units

 

#M0202V

10,000 units

 

 

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